在蚓激酶制劑的研發(fā)與生產(chǎn)過程中，針對蚓激酶對溫度和pH敏感的特性，國內(nèi)某上市公司創(chuàng)新性地引入歐世盛全自動在線紫外檢測系統(tǒng)，建立了實(shí)時在線的質(zhì)量控制方案。 1.背景
地龍蚓激酶是從傳統(tǒng)中藥地龍（蚯蚓）中提取制備的蛋白水解酶制劑，其主要活性成分為具有纖溶作用的蚓激酶（Lumbrukinase），是從特種蚯蚓中提取的一組蛋白水解酶（酸性蛋白質(zhì)），分子量為16–45 kDa。該酶制劑通過選擇性降解纖維蛋白原和纖維蛋白，發(fā)揮抗血栓、改善微循環(huán)等藥理作用。
蚓激酶對溫度和pH較為敏感，在提取和純化過程中，若溫度過高或pH值不合適，會導(dǎo)致蚓激酶活性降低甚至失活。傳統(tǒng)手動取樣送檢成本較高，對操作人員的技術(shù)水平要求高，產(chǎn)品批次穩(wěn)定性差，人員和時間投入大。
2.應(yīng)用案例
某上市公司在蚓激酶柱層析提取檢測中采用了歐世盛全自動在線紫外檢測系統(tǒng)，紫外吸光度值變化實(shí)時在線監(jiān)測，根據(jù)工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對紫外吸光度值的要求，自動切換不同洗脫液、提取液，實(shí)現(xiàn)蚓激酶提取過程的連續(xù)化和自動化。
檢測過程 收集液首先收集到收集瓶中，通過蠕動泵將收集瓶中的液體再輸送至原收集管道中，當(dāng)檢測到液位下限的時候，啟動蠕動泵，當(dāng)液位下限檢測器檢測不到液體時，停止蠕動泵工作（蠕動泵流速≥出液流速）。上限液位傳感器作為報警傳感器，當(dāng)上限液位傳感器檢測到液體時，蠕動泵流速加大1倍，當(dāng)持續(xù)某個時間后，上限液位傳感器仍能檢測到液體，則發(fā)出報警信號，同時關(guān)閉入口及出口閥。
系統(tǒng)控制 系統(tǒng)包括在線紫外檢測單元、控制單元、洗脫液控制開關(guān)、提取液控制開關(guān)、取樣液控制開關(guān)、清洗開關(guān)等。通過紫外檢測單元持續(xù)獲得提取液的吸光度，進(jìn)而基于吸光度對洗脫液控制開關(guān)進(jìn)行控制，以實(shí)現(xiàn)洗脫液的切換，并根據(jù)在切換洗脫液之后獲得的吸光度，對提取液控制開關(guān)進(jìn)行控制，以收集到目標(biāo)提取液體。在停止收集目標(biāo)提取液體的情況下，控制清洗開關(guān)打開，以使清洗液經(jīng)清洗液管道流入紫外檢測單元對紫外檢測單元進(jìn)行清洗。
實(shí)現(xiàn)目標(biāo) 一個在線紫外取樣檢測器實(shí)現(xiàn)兩根提取柱的取樣檢測并能自動控制其洗脫液切換、提取液收集與排污切換，極大提高生產(chǎn)效率。
在線紫外檢測器與島津離線紫外檢測數(shù)據(jù)對比 大量現(xiàn)場吸光度測試數(shù)據(jù)從下圖對比可以看出，在線紫外數(shù)據(jù)測試穩(wěn)定可靠，偏差小；且在高吸光度值時無需稀釋直接檢測。
島津離線紫外檢測一般步驟：
1.聯(lián)機(jī)進(jìn)入測量掃描界面。
2.根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，設(shè)置檢測參數(shù)。
3.在樣品室內(nèi)參比及檢測光路同時放入裝有空白溶液的比色皿。
4.點(diǎn)擊“基線測量”以扣除空白的背景吸收。
5.人工取樣送至理化分析室，裝入比色皿（高濃度稀釋），將檢測光路中的空白溶液換成待測樣品，點(diǎn)擊“掃描”完成樣品掃描檢測。
6.將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈，倒立晾干放回樣品室內(nèi)。
歐世盛在線紫外檢測一般步驟：
1.開機(jī)初始化，設(shè)備預(yù)熱。
2.切換閥自動切換到清洗位，自動沖洗，自動校零。
3.樣品液泵入比色皿，實(shí)時顯示吸光度數(shù)值。
4.廢液通過廢液蠕動泵輸送到原裝置廢液管中。
5.測量結(jié)束切換閥調(diào)至清洗位，自動沖洗。
核心優(yōu)勢對比
3.總結(jié)
全自動在線紫外檢測系統(tǒng)的核心優(yōu)勢在于將實(shí)驗(yàn)室能力“現(xiàn)場化”：通過免試劑、全自動、秒級響應(yīng)的設(shè)計(jì)，解決了離線方法在實(shí)時性、人力成本和環(huán)境風(fēng)險上的瓶頸，尤其適用于需要高頻監(jiān)測的場景。
